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FITC-PEG-BIOTIN 是一種三功能連接分子，由熒光素（FITC）、聚乙二醇（PEG）和生物素三部分組成。FITC 具備綠色熒光示蹤功能（Ex/Em：495/519 nm），PEG 提供分子柔性和親水性，可增強溶解性與穩(wěn)定性，而生物素能特異性結(jié)合親和素或鏈霉親和素。此構(gòu)造常用于構(gòu)建熒光標記的靶向系統(tǒng)、生物成像、納米載體修飾和親和捕獲等研究。適合在細胞實驗、診斷檢測或蛋白探針標記中使用，兼具識別與成像雙重功能。
中文名稱：熒光素標記聚乙二醇-生物素
英文名稱：FITC-PEG-Biotin
別名：熒光生物素-PEG、FITC-PEG?-Biotin、FITC-PEGylated Biotin
CAS號：無固定CAS（為定制連接分子）
結(jié)構(gòu)類型：FITC—PEG—Biotin（三元功能分子）
二、分子構(gòu)成與說明
FITC-PEG-Biotin 是一種三功能修飾分子，由以下三部分組成：
1. FITC（Fluorescein Isothiocyanate）
提供綠色熒光信號，便于可視化標記或熒光成像；
通常通過異硫氰酸酯與氨基反應(yīng)形成穩(wěn)定硫脲鍵。
2. PEG（聚乙二醇）
提高分子親水性和柔韌性；
分子量常用規(guī)格為：PEG? = 500、1000、2000、3400、5000；
通過線性或單端官能化PEG提供空間間隔作用，減少非特異性結(jié)合。
3. Biotin（生物素）
可與鏈霉親和素/親和素高親和結(jié)合（Kd ≈ 10?1? M）；
用于靶向捕獲、固定化、免疫分析等生物識別場景。
三、物化屬性
項目 | 參數(shù) | ||
分子量 | 約 800–6000 Da（取決于 PEG 分子量） | ||
外觀 | 淡黃色至橙黃色固體或粘稠液體（低MW為固體，高MW為粘稠液） | ||
溶解性 | 良好溶于水、PBS、DMSO、DMF、乙醇等；不溶于醚類或烴類溶劑 | ||
熒光激發(fā)波長 | λ_ex ≈ 490–495 nm | ||
熒光發(fā)射波長 | λ_em ≈ 518–520 nm（綠色熒光） | ||
穩(wěn)定性 | 干燥避光條件下穩(wěn)定，溶液中較易光解 | ||
儲存條件 | 干燥粉末建議 -20°C 密閉避光儲存；水溶液推薦分裝于避光小管中冷凍保存 | ||
pH 穩(wěn)定范圍 | *佳使用范圍為 pH 6.5–8.0 | ||
|
四、制備方法簡介
FITC-PEG-Biotin 典型合成路線如下：
1. 合成 PEG-Biotin：通過 NHS-Biotin 與氨基修飾 PEG 發(fā)生酰胺鍵反應(yīng)；
2. 連接 FITC：使用 FITC 與 PEG-Biotin 末端氨基反應(yīng)，形成穩(wěn)定的 FITC-PEG-Biotin；
3. 純化：使用透析、凝膠過濾或 HPLC 純化；
4. 干燥：低溫凍干以便于儲存與運輸。
五、主要應(yīng)用領(lǐng)域
1. 熒光示蹤與成像
可用于細胞、組織、納米粒子的可視化；
綠色熒光適配多種共聚焦顯微鏡、流式細胞儀檢測系統(tǒng)。
2. 親和素-生物素系統(tǒng)中的熒光標記探針
與親和素/鏈霉親和素偶聯(lián)物結(jié)合實現(xiàn)高親和熒光成像或固定化；
常用于 ELISA、生物芯片、磁珠捕獲、熒光免疫分析等。
3. 納米材料功能化修飾
修飾脂質(zhì)體、納米粒、磁珠、納米膠束、水凝膠等；
提供熒光與靶向雙重功能。
4. PEG藥物載體或蛋白偶聯(lián)劑的構(gòu)建
構(gòu)建熒光示蹤的 PEGylated 載藥系統(tǒng)；
也可用于蛋白偶聯(lián)物追蹤研究其體內(nèi)外行為。
六、常見規(guī)格與形式
名稱 | PEG分子量 | 形式 | ||||
FITC-PEG500-Biotin | 500 Da | 固體 | -20°C 避光儲存 | |||
FITC-PEG2000-Biotin | 2 kDa | 固體或粘稠液 | -20°C 避光儲存 | |||
FITC-PEG5000-Biotin | 5 kDa | 粘稠液體 | -20°C 避光儲存 | |||
七、使用方法建議
建議使用前用 DMSO 或 PBS 溶解至所需濃度；
避光操作，避免強光照射導(dǎo)致熒光團降解；
建議現(xiàn)配現(xiàn)用，長期存放可按 0.1–1 mg/mL 分裝凍存；
配體修飾時，可與胺基表面、蛋白質(zhì)或材料通過親和素連接。
八、中文文獻應(yīng)用實例
1. 《生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志》，2021
使用 FITC-PEG-Biotin 修飾多肽探針，通過鏈霉親和素固定于微陣列芯片，用于微量生物標志物熒光檢測。
2. 《分析化學(xué)》，2020
利用 FITC-PEG-Biotin 標記磁珠，實現(xiàn)細胞表面糖鏈識別和富集成像，驗證其靈敏性與特異性。
3. 《藥學(xué)學(xué)報》，2022
在腫瘤靶向納米載藥系統(tǒng)構(gòu)建中，使用 FITC-PEG-Biotin 實現(xiàn)納米顆粒的雙功能修飾：生物素結(jié)合靶向、FITC熒光示蹤體內(nèi)分布。
九、優(yōu)點總結(jié)
? 同時具備 親和素結(jié)合能力 + 熒光可視化 + PEG鏈延展性；
? 可在不影響靶點結(jié)合的情況下提升水溶性；
? 操作簡單、標記穩(wěn)定，適合生物傳感、材料修飾和體內(nèi)示蹤。
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