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FITC-D-Lys,F(xiàn)ITC標(biāo)記D-賴氨酸這種熒光探針的使用說明

時(shí)間:2025-05-22 20:26:54       瀏覽:4

FITC-D-LysFITC標(biāo)記D-賴氨酸)

FITC-D-Lys 是異硫氰酸熒光素(FITC)與D-型賴氨酸結(jié)合形成的小分子熒光探針。D-賴氨酸不被多數(shù)天然酶識(shí)別,具有較高穩(wěn)定性。FITC 提供綠色熒光特性(Ex/Em495/519 nm),可用于標(biāo)記細(xì)胞、細(xì)胞壁、菌體、聚合物或用于可視化的生物相互作用研究。因其小分子特性,穿透性強(qiáng)且容易修飾,常用于研究細(xì)菌胞壁合成、靶向標(biāo)記以及探針設(shè)計(jì)開發(fā)。適用于熒光顯微、流式細(xì)胞術(shù)和免疫檢測。

一、名稱與基本信息

名稱:FITC-D-Lys

中文名稱:熒光素標(biāo)記D-賴氨酸

英文名稱:Fluorescein Isothiocyanate-D-Lysine

別名

FITC-D-Lysine、D-Lys(FITC)、D-賴氨酸熒光素偶聯(lián)物

分子式:C??H??NO?SD-Lys

分子量:約 470600 Da(取決于是否為游離堿形式或鹽形式)

純度:≥95%HPLC

FITC-D-Lys 

二、分子結(jié)構(gòu)與構(gòu)成說明

FITC-D-Lys 是將 熒光素異硫氰酸酯(FITC) 共價(jià)連接到 D-型賴氨酸(D-Lysine) 分子上的一種熒光氨基酸衍生物。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)如下:

FITC 部分:提供綠色熒光,可用于激發(fā)與檢測;

D-Lys 部分:帶正電的氨基酸,D-構(gòu)型可增強(qiáng)對蛋白酶的穩(wěn)定性,常用于研究非天然氨基酸代謝路徑及肽類藥物中的穩(wěn)定片段;

連接方式:FITC 通過其異硫氰酸基(–N=C=S)與 D-Lys 的 ε-氨基基團(tuán)形成穩(wěn)定的 硫脲鍵(–NHC(=S)NH–)。

 

三、物化屬性

項(xiàng)目

參數(shù)

 

外觀

黃色至橙色粉末

 

分子量

~470–600 Da

 

熒光激發(fā)波長

λ_ex ≈ 490–495 nm

 

熒光發(fā)射波長

λ_em ≈ 518–520 nm(綠色熒光)

 

溶解度

溶于 DMSODMF、水、PBS、少量乙醇或甲醇

 

穩(wěn)定性

避光條件下,干燥粉末穩(wěn)定;溶液中較易光降解

 

儲(chǔ)存條件

干燥粉末建議 -20°C 避光儲(chǔ)存;溶液推薦分裝于避光小管中冷凍保存

pH 穩(wěn)定范圍

* pH 6.0–8.0

 

CAS號(hào)

無固定CAS(屬于定制/衍生物)

 

 

四、特點(diǎn)

1. 具有生物兼容性:D-Lys為天然氨基酸的對映異構(gòu)體,不易被天然蛋白酶降解;

2. 熒光可視化:FITC熒光團(tuán)便于在可見光通道下成像和檢測;

3. 適合細(xì)胞/組織實(shí)驗(yàn):常用于細(xì)胞攝取、膜結(jié)合、組織滲透實(shí)驗(yàn);

4. 適合肽合成/蛋白修飾:可作為氨基酸構(gòu)建單元用于多肽合成。

 

五、制備方法簡介

FITC-D-Lys 一般通過如下步驟制備:

1. 在堿性條件下(如碳酸氫鈉緩沖液中),使 FITC 與 D-Lys(游離氨基)發(fā)生硫脲偶聯(lián)反應(yīng);

2. 反應(yīng)通常在黑暗中、室溫或4°條件下進(jìn)行1224小時(shí);

3. 使用HPLC或?qū)游鲋M(jìn)行純化;

4. 凍干收集產(chǎn)物。

 

六、主要應(yīng)用領(lǐng)域

1. 細(xì)胞生物學(xué)與示蹤成像

用于檢測細(xì)胞攝取功能;

可作為標(biāo)記分子進(jìn)入細(xì)胞膜或胞質(zhì);

FITC-D-Lys進(jìn)入細(xì)胞后,可在顯微鏡下觀察細(xì)胞定位。

2. 多肽與蛋白研究

作為氨基酸單元參與固相多肽合成(SPPS);

制備穩(wěn)定的D-肽并標(biāo)記熒光以研究其體內(nèi)外行為。

3. 生物分子熒光標(biāo)記

通過其氨基端進(jìn)一步連接其他靶分子如寡核苷酸、抗體等;

用于構(gòu)建熒光探針與傳感器。

4. 納米材料表面修飾

修飾聚合物微球、納米粒子或水凝膠表面,實(shí)現(xiàn)熒光可視化與靶向功能。

 

七、參考文獻(xiàn)摘要(中文)

1. 《中國細(xì)胞生物學(xué)雜志》,2020

   使用FITC-D-Lys示蹤肽類遞送系統(tǒng)在腫瘤細(xì)胞中的攝取效果,通過激光共聚焦顯微鏡追蹤其胞內(nèi)分布,驗(yàn)證了D-構(gòu)型的穩(wěn)定性與良好成像能力。

2. 《分析測試學(xué)報(bào)》,2021

   FITC-D-Lys被用于構(gòu)建一種新型多肽納米傳感器,用于檢測癌細(xì)胞表面標(biāo)志物,實(shí)現(xiàn)了快速、靈敏的熒光檢測。

3. 《材料科學(xué)與工程學(xué)報(bào)》,2022

   研究人員在水凝膠骨架中接枝FITC-D-Lys,實(shí)現(xiàn)了對膠體系統(tǒng)中蛋白吸附與擴(kuò)散行為的實(shí)時(shí)追蹤。

 

八、使用建議

使用前:在避光條件下用無菌無水DMSOPBS制備成110 mM儲(chǔ)備液;

反應(yīng)條件:可與親核試劑反應(yīng),也可作為肽合成原料;

儲(chǔ)存注意:使用后及時(shí)密封避光冷凍,避免反復(fù)凍融與強(qiáng)光照射。

 

九、訂購信息(示意)

名稱

規(guī)格

儲(chǔ)存條件

FITC-D-Lys

1 mg

-20°C 避光

FITC-D-Lys

5 mg

-20°C 避光

FITC-D-Lys

10 mg

-20°C 避光

 

十、結(jié)語

FITC-D-Lys 是一種功能強(qiáng)大、應(yīng)用廣泛的熒光氨基酸探針,集成了生物穩(wěn)定性、可追蹤性及化學(xué)活性于一體,適用于細(xì)胞、分子、材料等多個(gè)層面的科學(xué)研究。其在多肽藥物開發(fā)、細(xì)胞示蹤、傳感器構(gòu)建及高分子材料修飾中展現(xiàn)出廣泛的應(yīng)用前景。


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