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FITC-Biotin，F(xiàn)luorescein Isothiocyanate-Biotin，熒光素標(biāo)記生物素資料分享

FITC-BIOTIN（熒光素標(biāo)記生物素）

FITC-BIOTIN 是由異硫氰酸熒光素（FITC）和生物素通過共價(jià)鍵連接而成的熒光探針。該分子保留了生物素對(duì)親和素/鏈霉親和素的高親和力，同時(shí)具有 FITC 的典型熒光特性（激發(fā)波長(zhǎng)約495 nm，發(fā)射約519 nm）。FITC-BIOTIN 常用于免疫熒光、細(xì)胞成像、親和標(biāo)記、ELISA 檢測(cè)及微陣列技術(shù)中。其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，水溶性良好，既具靶向識(shí)別能力又具熒光示蹤功能，是分子探針和納米載體修飾的優(yōu)選標(biāo)記分子。

一、簡(jiǎn)介

名稱：FITC-Biotin

中文名稱：熒光素標(biāo)記生物素

英文別名：Fluorescein-Biotin，F(xiàn)luorescein Isothiocyanate-Biotin，Biotin-FITC

化學(xué)式：C??H??N?O?S（典型結(jié)構(gòu)）

分子量：約 449.5 g/mol（視結(jié)構(gòu)而略有變化）

結(jié)構(gòu)特征：由熒光素異硫氰酸酯（FITC）與生物素分子通過共價(jià)方式偶聯(lián)而成，具有雙重功能：熒光標(biāo)記與生物素-親和素識(shí)別能力。

二、分子結(jié)構(gòu)與組成

FITC-Biotin 是一種將熒光素（Fluorescein）與生物素（Biotin）通過穩(wěn)定的共價(jià)鍵連接的分子探針。典型結(jié)構(gòu)為 FITC 通過其異硫氰酸基團(tuán)（–N=C=S）與 Biotin 上的氨基反應(yīng)，生成穩(wěn)定的硫脲鍵。

FITC（Fluorescein isothiocyanate）：一種綠色熒光染料，廣泛用于標(biāo)記蛋白質(zhì)、抗體、核酸等，具有良好的光穩(wěn)定性。

Biotin：天然維生素B7，能夠與親和素（Avidin）或鏈霉親和素（Streptavidin）結(jié)合，親和力*強(qiáng)（Kd ~10?1? M）。

 

三、物化性質(zhì)

項(xiàng)目	描述
外觀	橙黃色或綠色固體粉末
分子量	~449.5 Da（結(jié)構(gòu)不同略有差異）
溶解性	溶于DMSO、DMF、微量乙醇、甲醇，少量可溶于PBS、水
熒光發(fā)射波長(zhǎng)	激發(fā)波長(zhǎng)：495 nm；發(fā)射波長(zhǎng)：519 nm（綠色熒光）
穩(wěn)定性	避光，干燥條件下穩(wěn)定；溶液狀態(tài)下易光降解
儲(chǔ)存條件	干燥粉末 -20°C，避光儲(chǔ)存；溶液建議 -20°C 避光并分裝使用，避免反復(fù)凍融
純度	通常 >95%（HPLC）

 

四、優(yōu)勢(shì)與特征

1. 雙重功能性：同時(shí)具備熒光檢測(cè)與生物素化親和功能；

2. 高靈敏度：FITC強(qiáng)熒光信號(hào)可實(shí)現(xiàn)微量檢測(cè)；

3. 高特異性：Biotin 可與 Streptavidin/NeutrAvidin 形成穩(wěn)定結(jié)合，廣泛用于拉下實(shí)驗(yàn)、免疫熒光、示蹤等；

4. 多用途兼容性：可用于生物素親和系統(tǒng)中與其他 Biotin 標(biāo)記或結(jié)合蛋白共同使用；

5. 小分子量：不會(huì)顯著影響靶標(biāo)的生物活性或空間結(jié)構(gòu)。

 

五、應(yīng)用領(lǐng)域

1. 免疫熒光染色（IF）

FITC-Biotin 可結(jié)合到鏈霉親和素（Streptavidin）標(biāo)記的抗體或蛋白上，實(shí)現(xiàn)靶標(biāo)的熒光成像。

2. 細(xì)胞標(biāo)記與追蹤

可用于活細(xì)胞或固定細(xì)胞的表面標(biāo)記，通過熒光顯微鏡觀察細(xì)胞功能或位置變化。

3. 熒光拉下實(shí)驗(yàn)（Pull-down）

利用Biotin-Streptavidin系統(tǒng)進(jìn)行靶分子的親和富集，F(xiàn)ITC熒光信號(hào)可用于追蹤或驗(yàn)證結(jié)合情況。

4. 核酸雜交

在原位雜交實(shí)驗(yàn)中，將 FITC-Biotin 探針用于標(biāo)記 DNA 或 RNA 探針，實(shí)現(xiàn)高靈敏度的目標(biāo)片段檢測(cè)。

5. 熒光傳感器開發(fā)

作為構(gòu)建熒光傳感平臺(tái)的功能性小分子，用于制備蛋白陣列、微球或微陣列芯片。

 

六、參考文獻(xiàn)應(yīng)用實(shí)例

1. Zhou et al., *Analytical Chemistry*, 2018

   > 利用FITC-Biotin結(jié)合鏈霉親和素-磁珠系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)miRNA的特異富集與熒光定量檢測(cè)。

2. Lee et al., *Biosensors & Bioelectronics*, 2021

   > 開發(fā)生物素-熒光標(biāo)記納米探針，實(shí)現(xiàn)癌細(xì)胞表面標(biāo)志物的快速檢測(cè)與成像。

3. Yamada et al., *Journal of Neurobiology*, 2002

   > 使用FITC-Biotin示蹤神經(jīng)元路徑，結(jié)合鏈霉親和素增強(qiáng)信號(hào)，實(shí)現(xiàn)高分辨率神經(jīng)成像。

 

七、使用方法建議

制備溶液：推薦使用無(wú)水DMSO或DMF配制母液（1–10 mM），分裝避光儲(chǔ)存；

結(jié)合反應(yīng)：

  可用于標(biāo)記含氨基生物分子，如蛋白質(zhì)、抗體；

  或通過親和素中介與其他生物素化物形成多聚體；

操作注意事項(xiàng)：

  避免強(qiáng)光直射，實(shí)驗(yàn)操作中使用黃光；

  使用后密封冷凍保存，防止光降解；

  實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行結(jié)合活性驗(yàn)證（可用鏈霉親和素-FITC標(biāo)準(zhǔn)比較信號(hào)強(qiáng)度）。

 

八、結(jié)語(yǔ)

FITC-Biotin 作為一種小分子熒光探針，結(jié)合了高親和生物素識(shí)別系統(tǒng)與強(qiáng)熒光發(fā)射能力，廣泛用于生命科學(xué)、藥物研究、分子診斷及納米技術(shù)等多個(gè)領(lǐng)域。其優(yōu)良的多功能性與靈活的結(jié)合方式使其成為構(gòu)建高靈敏度檢測(cè)平臺(tái)與靶向標(biāo)記系統(tǒng)的理想選擇。

以上資料由小編zhn提供，僅用于科研

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