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DSPE-PEG-RVG29磷脂-聚乙二醇-糖蛋白多肽試劑

一、產(chǎn)品名稱與基本信息

中文名：磷脂-聚乙二醇-糖蛋白多肽

英文名：DSPE-PEG-RVG29 (1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-polyethylene glycol-RVG29 peptide)

該材料在靶向穿越血腦屏障遞送系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)疾病治療、腦腫瘤給藥、腦部成像探針、基因治療遞送載體等方向具有關(guān)鍵性應(yīng)用。

二、RVG29多肽序列與分子量

多肽名稱：RVG29（Rabies Virus Glycoprotein peptide, 29-residue）

多肽序列：YTIWMPENPRPGTPCDIFTNSRGKRASNG

氨基酸數(shù)目：29個

理論分子量：約 3326 Da（視是否含修飾殘基略有變化）

RVG29來源于狂犬病毒糖蛋白的205–233氨基酸區(qū)域，是一段被證明具有特異性穿透血腦屏障能力的多肽。其作用機(jī)制主要通過結(jié)合宿主神經(jīng)元表面的乙酰膽堿受體（nAChR），從而通過跨神經(jīng)突觸通路進(jìn)入中樞系統(tǒng)。研究顯示，RVG29不會激活神經(jīng)元或產(chǎn)生毒性，是理想的CNS靶向修飾配體。

常見修飾形式：

N端含Cys殘基（C-RVG29）：便于與馬來酰亞胺PEG反應(yīng)

生物素化、多熒光標(biāo)記版本：用于成像或檢測

環(huán)化或序列截短版：改良穿腦效率和穩(wěn)定性

RVG29與DSPE-PEG結(jié)合后，其表面朝外的肽段可用于主動靶向腦部組織和神經(jīng)細(xì)胞，在各類腦部遞送系統(tǒng)中廣泛應(yīng)用。

三、主要應(yīng)用領(lǐng)域

1. 血腦屏障穿越藥物遞送系統(tǒng)

RVG29是目前*成熟的跨血腦屏障多肽之一。DSPE-PEG-RVG29作為表面功能分子修飾脂質(zhì)納米粒、聚合物納米粒、外泌體、蛋白-納米復(fù)合物等，可賦予系統(tǒng)主動穿越BBB的能力。已廣泛用于治療：

腦膠質(zhì)瘤

帕金森病、阿爾茲海默病

癲癇

CNS病毒感染（如HIV相關(guān)神經(jīng)病變）

2. siRNA、mRNA、DNA等基因藥物腦遞送

DSPE-PEG-RVG29修飾的脂質(zhì)體、固體脂質(zhì)納米粒（SLNs）、LNPs被用于RNAi和CRISPR/Cas9系統(tǒng)的腦部投送。RVG29肽的受體介導(dǎo)攝取機(jī)制使其具有特異性強(qiáng)、穿透效率高、毒性低的優(yōu)點(diǎn)，解決了核酸類藥物難以突破BBB的關(guān)鍵難題。

3. 中樞神經(jīng)成像與診斷探針

通過將近紅外染料（如Cy5.5、ICG）、MRI對比劑（如Gd-DTPA）、PET示蹤物（如64Cu）等偶聯(lián)至DSPE-PEG-RVG29構(gòu)成的探針，可實(shí)現(xiàn)腦瘤或神經(jīng)炎癥的高分辨成像，有助于神經(jīng)疾病早期診斷與術(shù)中導(dǎo)航。

4. 神經(jīng)保護(hù)與神經(jīng)修復(fù)治療

DSPE-PEG-RVG29可遞送神經(jīng)營養(yǎng)因子（如NGF、BDNF）、抗氧化酶類（如SOD）等至腦組織，對腦缺血再灌注、脊髓損傷等具有治療價值。此外，在自體干細(xì)胞治療方向，RVG29也用于干細(xì)胞表面修飾，以增強(qiáng)其向腦部病灶靶向歸巢能力。

5. 腦部疫苗/免疫治療

將DSPE-PEG-RVG29用于構(gòu)建腦部靶向疫苗納米平臺（如RNA疫苗、納米佐劑疫苗等）是一大前沿方向，可用于抗腦瘤疫苗、狂犬病疫苗遞送等。

四、合成與制備方法

1. 原料與反應(yīng)設(shè)計

DSPE-PEG-Mal：馬來酰亞胺末端的DSPE-PEG，用于與含巰基的RVG29多肽反應(yīng)；

Cys-RVG29：N端引入巰基的RVG29肽，可與Mal基團(tuán)反應(yīng)形成穩(wěn)定的硫醚鍵；

緩沖液：pH 6.5–7.0 HEPES或PBS緩沖體系。

2. 合成步驟

（1）將DSPE-PEG-Mal溶解于適量無菌PBS緩沖液中（通常用DMSO或乙醇預(yù)溶）
（2）加入過量的Cys-RVG29，反應(yīng)在避光條件下、室溫至37°C攪拌反應(yīng)4–12小時
（3）用透析或Sephadex G-25柱純化去除未反應(yīng)肽段
（4）凍干得到白色粉末

3. 表征方法

HPLC：檢測純度與偶聯(lián)率

MALDI-TOF MS：驗證結(jié)構(gòu)完整性

FTIR/NMR：結(jié)構(gòu)驗證

熒光標(biāo)記（若有）：檢測偶聯(lián)效率

注意事項：

避免氧化條件造成巰基交聯(lián)；

多肽濃度與PEG末端基團(tuán)摩爾比建議為1.2–2.0:1，保證充分反應(yīng)；

可將反應(yīng)體系置于氮?dú)庀聰嚢枰詼p少副反應(yīng)。

五、發(fā)展前景與挑戰(zhàn)

1. 潛力廣闊的跨血腦屏障載體平臺

RVG29是迄今為止腦部靶向性能*明確、穩(wěn)定性和生物相容性良好的穿腦肽之一。DSPE-PEG作為脂質(zhì)修飾平臺可與多種納米載體兼容，包括LNP、脂質(zhì)體、固體脂質(zhì)納米粒、聚合物膠束、外泌體、混合納米膠束等，適配性強(qiáng)。

2. 與RNA藥物、蛋白藥物等協(xié)同發(fā)展

隨著mRNA疫苗、siRNA藥物、酶替代療法等快速發(fā)展，如何將這些大分子遞送至CNS仍是醫(yī)學(xué)瓶頸。DSPE-PEG-RVG29可以作為模塊化構(gòu)件嵌入多功能遞送系統(tǒng)，與當(dāng)前核酸藥物技術(shù)形成強(qiáng)協(xié)同。

3. 適配納米機(jī)器人與自驅(qū)動遞送載體

未來腦部智能納米載體將集成響應(yīng)性釋放、導(dǎo)航控制、靶向識別等多功能，RVG29作為“方向感知器”將在這些系統(tǒng)中繼續(xù)發(fā)揮關(guān)鍵作用。與磁場導(dǎo)航系統(tǒng)、聲控驅(qū)動系統(tǒng)結(jié)合，將大幅拓展其智能化應(yīng)用。

4. 當(dāng)前面臨的挑戰(zhàn)與改進(jìn)方向

RVG29的體內(nèi)穩(wěn)定性及酶降解問題仍需優(yōu)化，可通過肽段環(huán)化、D-氨基酸替代等方式改良；

偶聯(lián)過程標(biāo)準(zhǔn)化與產(chǎn)業(yè)化成本控制仍存在難度；

體內(nèi)脫靶可能性（如nAChR在外周組織表達(dá)）需更多藥代動力學(xué)研究驗證。