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熒光修飾量子點的常用方法

時間:2020-11-26 17:48:27       瀏覽:1339

量子點是由硒化鎘(CdSe)、碲化鎘(CdTe)、硫化鎘(CdS)、硒化鋅(ZnSe)、磷化銦(InP)、砷化銦(InAs)或是CdSe核上包裹一層ZnS或CdS組成的納米晶或半導體納米晶。

 

量子點的修飾方法

量子點可與特定抗體或小分子結(jié)合,在不改變其化學性質(zhì)的情況下,受到光源激發(fā)后可發(fā)出特定波長的熒光,實現(xiàn)對靶向目標標的識別及檢測。量子點與生物大分子如核酸、蛋白質(zhì)、養(yǎng)分載體等之間的結(jié)合,常用有以下幾種方法:

 

一、 靜電吸引法

1. 正電荷氫核遇到另一個電負性強的原子時,產(chǎn)生靜電吸引。巰基乙酸修飾的量子點表面帶負電,與帶正電的蛋白質(zhì)表面可通過靜電吸引連接。

2. 對于帶中性電荷的蛋白質(zhì),可通過改造蛋白質(zhì)在其末端構(gòu)建帶正電荷的結(jié)構(gòu),使其能靜電吸附于量子點表面。

 

3. 通過對量子點表面修飾使其帶負電荷后,還可靜電吸附連接上親和素,依靠生物素-親和素的高特異性結(jié)合,間接將量子點連接到蛋白質(zhì)分子上。

優(yōu)點:降低量子點的表面缺陷,增加量子點的熒光強度。

缺點:當?shù)鞍踪|(zhì)比例過大時,蛋白質(zhì)之間產(chǎn)生交叉結(jié)合使部分量子點聚積,降低量子點熒光強度。

 

二、 常規(guī)交聯(lián)劑連接法

1. 交聯(lián)劑是一類小分子化合物,具有兩個或者更多的針對特殊基團(如氨基、巰基)的反應性末端,可和兩個或更多分子偶聯(lián)使這些分子結(jié)合在一起。

2. 利用這些交聯(lián)劑可使量子點上修飾的羧基與小分子物質(zhì)的氨基通過縮合作用進行偶聯(lián)修飾。

3. 經(jīng)配體交換修飾QDs用EDC和NHS法可以連接到成纖維細胞上,這種量子點可以穿透細胞膜,到達細胞核

 

三、 生物素-親和素法

生物素-親和素系統(tǒng)(BAS)由于具有生物素與親和素之間的高度親和力及多級放大效應,并與熒光素、酶、同位素等免疫修飾技術(shù)可以有機地結(jié)合起來,使各種示蹤免疫分析的特異性和靈敏度進一步提高。

 

目前最常用方法是通過生物素-鏈(霉)親和素系統(tǒng)結(jié)合,用于抗原抗體相互識別、活體修飾及特異性修飾,這種量子點探針靈敏度高、熒光信號強。

 

量子點的修飾的優(yōu)點

在各種量子點中,CdTe量子點應用較多。與傳統(tǒng)修飾材料相比,量子點優(yōu)點

1. 熒光強度高;

2. 發(fā)光顏色多樣;

3. 適應于空間及光譜的多重傳輸;

4. 量子點的冷光壽命一般在30~100ns

5. 量子點波譜范圍寬。

 

量子點修飾的不足

量子點修飾可誘導氧自由基的產(chǎn)生,對生物活性物質(zhì)具有一定毒性,這些毒性可通過偶聯(lián)到蛋白質(zhì)分子上或者覆蓋一層低毒物質(zhì)來降低。量子點和某些蛋白質(zhì)結(jié)合后可能導致量子點的熒光減弱或淬滅,如銅/鋅-超氧化物歧化酶對CdSe量子點的熒光有明顯的淬滅作用。

 

量子點系列:

 

CdSe/ZnS 量子點

碳量子點

CQDs

carbon dots

C-dots

石墨烯量子點

GQDs

黑磷量子點

鈣鈦礦量子點

鎘量子點

水溶性量子點

油溶性量子點

InP/ZnS量子點

ZnCdS/ZnS量子點

CdTe/CdS量子點

CdTe/CdSe/ZnS量子點

CuInS/ZnS量子點

硫化鎘量子點

InP量子點

ZnSe量子點

CdSe量子點

PbS量子點

PbS/CdS量子點

烷基修飾量子點

梯度合金量子點

熒光量子點

CuInS2量子點

CdSe/ZnTe核殼量子點

Cs4PbBr6納米晶

CsPbI3鈣鈦礦量子點

rGO@BPQDs

碲化鎘量子點

PAA-CdSe/ZnS量子點

熒光硅量子點

三元合金量子點

半導體量子點

CsPbBr3量子點

CZTS量子點

核殼結(jié)構(gòu)半導體量子點

N-CQDs

BPQDs

ZnSe/ZnS QDS

CdTe/CdS QDS

PbS QDS

PEG-BPQDs

W-CDs

CuInS2/ZnS QDS

CdSe QDS

CdS QDs

CdZnS/ZnS QDs

CdSeTe/ZnS QDs

InP/ZnS QDs

CuInS/ZnS QDs

MPA-CdTe QDs

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