TRITC-Dextran 四甲基羅丹明標(biāo)記葡聚糖在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
一、基本信息
中文名:TRITC-葡聚糖 / 四甲基羅丹明標(biāo)記葡聚糖
英文名:TRITC-Dextran (Tetramethylrhodamine isothiocyanate-Dextran)
別稱:四甲基羅丹明異硫氰酸酯-葡聚糖、紅色熒光葡聚糖、TMR-Dextran、Rhodamine T-Dextran
結(jié)構(gòu)組成:天然葡聚糖(Dextran)通過共價(jià)鍵連接四甲基羅丹明異硫氰酸酯(TRITC)
TRITC-Dextran 是一種將紅色熒光染料 TRITC(四甲基羅丹明異硫氰酸酯)標(biāo)記到天然葡聚糖上的熒光探針材料。它具有良好的水溶性、生物相容性和穩(wěn)定熒光特性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞吞噬實(shí)驗(yàn)、血管滲透性分析、生物屏障研究、組織成像與藥物釋放等領(lǐng)域。
二、光學(xué)性質(zhì)
激發(fā)波長(λ_ex):540–555 nm
發(fā)射波長(λ_em):570–590 nm
熒光顏色:鮮紅色 / 橙紅色
適用激光源:常用 543 nm 或 561 nm 激光,兼容 Cy3/FITC 濾片
TRITC-Dextran 與 RB-Dextran 光譜特性相近,但具有更強(qiáng)的熒光穩(wěn)定性和更高的信噪比,適合熒光顯微鏡、共聚焦顯微成像和流式細(xì)胞分析等實(shí)驗(yàn)。
三、物化屬性
分子量(Dextran):常見規(guī)格包括 3 kDa、10 kDa、40 kDa、70 kDa、150 kDa 等
物理形態(tài):橙紅色至粉紅色粉末
溶解性:高度親水,易溶于水、PBS、HBSS、細(xì)胞培養(yǎng)基等
穩(wěn)定性:干燥避光儲(chǔ)存穩(wěn)定,溶液狀態(tài)下需低溫避光保存
連接方式:TRITC 的異硫氰酸酯基團(tuán)與葡聚糖上的氨基反應(yīng)形成穩(wěn)定的硫脲鍵
四、合成方法概述
氨基修飾:將葡聚糖通過氯乙酸、乙二胺(EDA)或己二酰肼(ADH)修飾為氨基化葡聚糖;
偶聯(lián)反應(yīng):TRITC 在堿性緩沖液(如 pH 8.5 碳酸鹽緩沖液)中與氨基化葡聚糖反應(yīng);
純化過程:采用透析袋或?qū)游龇ㄈコ唇Y(jié)合的游離染料;
干燥保存:冷凍干燥后制得橙紅色粉末狀產(chǎn)物。
五、主要應(yīng)用領(lǐng)域
細(xì)胞吞噬與內(nèi)吞實(shí)驗(yàn)
用于檢測巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等免疫細(xì)胞對(duì)大分子的攝取能力。
血管滲透性與組織屏障研究
TRITC-Dextran 被廣泛用于腦血管屏障(BBB)、腸道屏障、肺泡屏障等研究。
體內(nèi)/體外熒光成像
通過靜脈注射或組織灌注,實(shí)現(xiàn)器官或組織熒光示蹤。
藥物載體釋放機(jī)制模擬
作為模型大分子研究藥物釋放與擴(kuò)散行為。
組織灌注與微循環(huán)示蹤
應(yīng)用于小動(dòng)物模型中腦、腎、肝等組織的灌注與可視化成像。
生物凝膠/水凝膠滲透研究
被廣泛用于評(píng)估凝膠材料對(duì)大分子的滲透性與屏障能力。
六、優(yōu)勢特點(diǎn)
? 強(qiáng)烈紅色熒光,成像清晰
? 高水溶性,便于制備和使用
? 多分子量可選,適配多種研究需求
? 熒光穩(wěn)定性強(qiáng),適合長時(shí)成像
? 廣泛適用于體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)
七、代表性文獻(xiàn)與應(yīng)用實(shí)例
Zlokovic, B. V. et al. TRITC-dextran permeability as a measure of BBB integrity. J. Cereb. Blood Flow Metab., 1990, 10, 678–689.
→ 研究腦血管通透性及神經(jīng)退行性病變中的屏障破壞。
Galea, J. et al. Use of TRITC-dextran for endothelial permeability assay. Brain Res., 2007, 1147, 39–46.
→ 應(yīng)用于原代腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞通透性分析。
Chen, J. et al. Hydrogel-based model to study TRITC-dextran diffusion and controlled release. Acta Biomater., 2014, 10, 3188–3196.
→ 以水凝膠包封 TRITC-Dextran 模擬大分子藥物釋放機(jī)制。
Sarin, H. et al. TRITC-dextran for monitoring of blood-brain barrier permeability in tumors. NeuroImage, 2009, 47, 45–55.
→ 腫瘤腦轉(zhuǎn)移模型中血管滲漏評(píng)估。
八、使用方法與保存建議
推薦使用濃度:0.1–10 mg/mL,依據(jù)實(shí)驗(yàn)具體需求;
溶液保存:4°C 避光保存,不建議超過 3–5 天;
粉末保存:–20°C 干燥避光條件下保存,可穩(wěn)定 1–2 年;
注意事項(xiàng):避免與金屬離子或強(qiáng)堿性物質(zhì)長時(shí)間接觸,避免高溫;使用前可采用 0.22 μm 濾膜除菌。
總結(jié)
TRITC-Dextran 是一種高性能的紅色熒光探針,將 TRITC 染料標(biāo)記到葡聚糖分子上,兼具良好的水溶性、生物相容性和熒光穩(wěn)定性。其在血管通透性分析、細(xì)胞吞噬實(shí)驗(yàn)、組織灌注成像、藥物釋放研究等方面應(yīng)用廣泛,是生物醫(yī)藥研究中重要的熒光示蹤材料之一。
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